典型樣品:動植物組織、植物葉片、礦石、土壤、玻璃、陶瓷、橡膠、塑料制品、固體廢棄物、電子廢棄物、紙張、紡織品、化學(xué)品、藥片、中藥材、食品等。
振動球磨儀采用上下垂直高速振蕩模式,可快速促進(jìn)細(xì)胞快速破碎、細(xì)胞裂解、組織均勻,使樣品研磨更加均勻;對樣品研磨的重復(fù)性更好,樣品間無交叉污染,節(jié)省時間和人工成本,是一種效率很高的樣品預(yù)處理設(shè)備。其還具有冷凍組件,可滿足用戶研磨和保存溫度敏感樣品的需求。
一、工作原理
振動球磨儀是通過振動的方式來實(shí)現(xiàn)對樣品的粉碎研磨。其工作區(qū)域安裝有兩個可高頻次振動(每分鐘可達(dá)1500次)的搖臂,搖臂形似機(jī)械手,可放置球磨罐或研磨適配器。
設(shè)備工作時,兩只搖臂作"∞"形運(yùn)動,即水平擺動,其帶動球磨罐內(nèi)部的研磨球,賦予其動能,研磨球在容器內(nèi)進(jìn)行高頻次、無規(guī)則的運(yùn)動,實(shí)現(xiàn)對樣品的撞擊和擠壓,完成粉碎和研磨。
二、振動球磨儀詳細(xì)的操作步驟如下:
1、在離心管中加入樣品、研磨球、裂解液(可?。?,蓋上蓋;
2、將裝好樣品的離心管放入適配器中;
3、將適配器及裝有樣品的離心管浸入液氮中進(jìn)行預(yù)冷凍;
4、將適配器裝到主機(jī)上,鎖緊固定裝置;
5、觀賞防護(hù)罩,按需求設(shè)定好參數(shù)后,開始研磨;
6、等儀器*停止振動后關(guān)機(jī),打開安全門,取出樣品;
7、儀器歸位。
三、工藝技術(shù):
1、平整度:
工件的平整度取決于磨盤的平整度。隨著加工領(lǐng)域的不斷深化及精度和效率要求越來越高:“WEIANDA"從鑄鐵盤、合成盤、銅盤、純錫盤、樹脂盤發(fā)展到金剛石盤,并通過各種方法把盤的平面訂修到佳達(dá)2um。
2、粗糙度:
表面粗糙度取決于磨料顆粒的大小、形狀和磨盤的材料, 以及工件材質(zhì)及硬度。
3、粗磨:
利用較粗顆粒度的磨料在磨盤與工件面上磨削,進(jìn)刀量大、效率高;但磨削面較粗,適用于磨削余量較多之工作。
4、中磨:
利用中度顆粒的磨料在磨盤與工件面上磨削,進(jìn)刀量快、效率高,表面粗糙度適中,適合磨削量一般之工件。
5、精磨:
利用較細(xì)顆粒度的磨料在磨盤中與工件面上磨削,進(jìn)刀量較小、表面光潔度好,磨削痕均勻而細(xì)。
6、軟拋光:
利用磨盤上加裝一個特殊材料拋光墊或拋光布,拋光料在拋光墊或拋光布之間運(yùn)動,使工件比硬拋光更有超鏡子一樣的高光潔度。
7、硬拋光:
利用合成盤、銅盤、錫盤、樹脂盤等非常高精密度的基面加入微米級金剛石磨料,使工件表面變得既高精密平面度,又有像鏡子一樣的高光潔度。
四、組織研磨儀的使用方法:
1、將儀器放置在干燥通風(fēng)的環(huán)境中,插上電源,觀察儀器控制顯示器是否正常亮燈。打開儀器,測試控制按鈕是否能正常使用,儀器空載運(yùn)行時是否有異響。
2、將適量樣品和研磨球放入球磨罐中,預(yù)留一定的研磨空間。初次研磨建議保持樣品和研磨球各占球磨罐容積的三分之一。
3、若需要預(yù)冷凍,可將裝有樣品的球磨罐放入液氮環(huán)境中冷卻3分鐘以上,然后再裝入儀器進(jìn)行研磨。使用液氮進(jìn)行預(yù)冷凍時,應(yīng)做好防護(hù)措施,防止被凍.傷。
4、將球磨罐放入振動球球磨儀的夾具內(nèi),慢慢轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)輪,依靠自動定位的緊固裝置固定好球磨罐,蓋上蓋子。
5、在控制顯示器上設(shè)定好研磨儀的運(yùn)行時間和擺動頻次,開始研磨。研磨完成后,轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)輪取下球磨罐。
振動球磨儀可對硬性、中硬性和脆性樣品進(jìn)行細(xì)粉碎和精細(xì)研磨,還適用于軟性、彈性、纖維質(zhì)材料的研磨前處理。既可干磨,也可濕磨,還可進(jìn)行冷凍低溫研磨,在農(nóng)業(yè)、生物醫(yī)藥、食品、地質(zhì)化工、環(huán)境、質(zhì)檢、高??蒲械榷鄠€行業(yè)的實(shí)驗(yàn)室都有廣泛應(yīng)用。
五、 實(shí)驗(yàn)試劑:
1.CTAB抽提液:
2%(w/v)CTAB
100 mmol/L Tris-HCl(pH8.0)
20 mmol/L EDTA(pH8.0)
1.4 mol/L NaCl
抽提含多酚較多的植物材料時(比如木本植物),上述抽提液中可另加入2%的PVP(聚乙烯吡咯烷酮)。
抽提液于室溫保存,可在幾年內(nèi)保持穩(wěn)定。臨用之前向裝有上述抽提液的試管中加入約2%-3%(v/v)的β-巰基乙醇。
2、醋酸鈉:
3 mol/L NaAc
用冰乙酸調(diào)pH值至4.8-5.2。
3、TE溶液:
4、其它:
無水乙醇,異丙醇,75%乙醇,酚:氯仿:異戊醇(25:24:1),氯仿:異戊醇(24:1),β-巰基乙醇,重蒸水。
六、 實(shí)驗(yàn)步驟
1. 樣品研磨
1) 取1g的樣品放入2ml ep管中
2) 加入1-2粒5mm研磨珠
3) 加入1ml的CTAB 抽提液
4) 將加有樣品的ep管放入高通量組織研磨儀的適配器中,蓋好
5) 將研磨轉(zhuǎn)速調(diào)到1800,設(shè)定研磨時間為90秒(可根椐樣品的研磨的難易程度來調(diào)節(jié),此數(shù)據(jù)是以銀杏落葉為樣本得出)
6) 啟動研磨儀對樣品進(jìn)行研磨(根據(jù)不同的樣品,本身性質(zhì)不同,需要對研磨頻率和研磨時間進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整)
2. DNA的粗提
1) 將研磨好的樣品取出于65℃水浴45min,中途間隔(輕柔)振蕩三次混勻
2) 冷卻后加入等體積氯仿:異戊醇(24:1),輕柔顛倒混勻使乳化10min
3) 7000g-8000g離心10min(18-20℃)
4) 吸取上清于另一干凈的離心管中
5) (根據(jù)需要可用氯仿:異戊醇如上法重復(fù)抽提一次,吸取上清)
6) 加入與上清液等體積(且已于-20℃預(yù)冷的異丙醇,顛倒混勻,約1至2分鐘后應(yīng)有白色絮狀沉淀出現(xiàn)(若沒有,則加入上清液1/5至1/10體積的pH4.8-5.2的3M NaAc,混勻,于-20℃冰箱中沉淀30min)
7) 離心法沉淀DNA
8) 在75%乙醇中漂洗DNA數(shù)分鐘以上,用Tip頭吸干乙醇
9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次
10) 沉淀于室溫或64℃以下的恒溫箱中干燥片刻至剛出現(xiàn)半透明,不要過度干燥
11) 用50μlTE溶解沉淀,可用65℃水浴助溶,DNA粗提物可用于粗略PCR等。
3. DNA的純化
1) 向TE溶解的DNA粗提物中入4-10μl RNaseA(約40-100μg)
2) 于37℃酶解RNA 1hr或65℃酶解RNA 30min以上
3) 加入50μl酚:氯仿:異戊醇(25:24:1),輕輕顛倒混勻10min
4) 10000g以上常溫離心10min,吸取上清
5) 加入50μl仿氯:異戊醇(24:1)輕輕顛倒10min
6) 10000g以上常溫離心10min,吸取上清 (根據(jù)需要可重復(fù)用氯仿:異戊醇如上法再抽提1-2次,以充分去除蛋白和酚)
7) 向上清中加入1/5-1/10體積的pH4.8-5.2的3M NaAc,并加入2.5倍體積無水乙醇,于-20℃沉淀30min以上
8) 12000g、4℃低溫離心10min,吸干液體
9) 沉淀用75%乙醇漂洗二次
10) 沉淀于室溫或64℃以下恒溫箱中干燥片刻至剛開始出現(xiàn)半透明狀,勿過度干燥加入50μl重蒸水溶解DNA,可于65℃水浴助溶
11) 取5μl DNA電泳檢查DNA的質(zhì)量
12) 100-500倍稀釋后于分光光度計上測定OD260及OD280,分析DNA的濃度和質(zhì)量
13) 保存DNA于-20℃
補(bǔ)充:如果需要提取的樣品比較多(比如1g),研磨好的樣品在后續(xù)的提取中,需要轉(zhuǎn)移到大的epp管中,研磨時可以加入較少的抽提液,研磨完畢按照1g樣品10ml提取液補(bǔ)充抽提液,進(jìn)行后續(xù)的操作。
振動球磨儀:高效、均勻、可控的樣品破碎方法
在科學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)中,樣品的處理是非常關(guān)鍵的步驟。組織研磨儀是一種能夠高效、均勻、可控地破碎樣品的設(shè)備,廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料科學(xué)等領(lǐng)域。
一、工作原理
振動球磨儀主要基于高速旋轉(zhuǎn)的研磨球?qū)悠愤M(jìn)行破碎。在研磨過程中,樣品被放置在研磨球和研磨腔之間,通過高速旋轉(zhuǎn)的研磨球?qū)悠愤M(jìn)行沖擊和摩擦,使樣品破碎成更小的顆粒。這種研磨方式能夠有效地保護(hù)樣品的原始結(jié)構(gòu)和成分,提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。
二、技術(shù)特點(diǎn)
高效性:能夠快速將樣品破碎成均勻的細(xì)小顆粒,提高實(shí)驗(yàn)效率。
均勻性:研磨球在樣品表面高速旋轉(zhuǎn),產(chǎn)生高能量碰撞和摩擦,使樣品破碎成更小的顆粒,保證樣品的均勻性。
可控性:研磨過程可以通過調(diào)節(jié)研磨球的數(shù)量、大小以及旋轉(zhuǎn)速度進(jìn)行控制,實(shí)現(xiàn)樣品的精細(xì)破碎。
保護(hù)性:能夠有效地保護(hù)樣品的原始結(jié)構(gòu)和成分,提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。
方便性:操作簡單,易于控制,能夠保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性和可比較性。
三、應(yīng)用場景
生物學(xué)應(yīng)用:在生物學(xué)領(lǐng)域,組織研磨儀被廣泛應(yīng)用于組織樣品的破碎和制備,如動物組織、植物組織等。通過對組織樣品的破碎和磨碎,為后續(xù)的生物化學(xué)分析、基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)研究提供均一、穩(wěn)定的樣本。
材料科學(xué)應(yīng)用:在材料科學(xué)領(lǐng)域,組織研磨儀被用于對各種材料進(jìn)行破碎和磨碎,以獲得具有特定物理和化學(xué)性質(zhì)的粉末或顆粒。例如,對陶瓷、金屬、高分子材料等進(jìn)行破碎和磨碎,以制備具有特定粒度和組成的復(fù)合材料或納米材料。
醫(yī)學(xué)應(yīng)用:在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,組織研磨儀被用于對生物醫(yī)學(xué)樣品進(jìn)行破碎和制備,如病理組織、生物細(xì)胞等。通過對樣品進(jìn)行破碎和磨碎,為后續(xù)的醫(yī)學(xué)研究和診斷提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)支持。
其他應(yīng)用:除了上述應(yīng)用領(lǐng)域外,組織研磨儀還被廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)、制藥工業(yè)、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。例如,在食品工業(yè)中,組織研磨儀可用于對食品原料進(jìn)行破碎和磨碎,以提高食品的口感和營養(yǎng)價值;在制藥工業(yè)中,組織研磨儀可用于對藥物原料進(jìn)行破碎和磨碎,以制備具有特定藥效的藥物顆粒。
振動球磨儀是一種高效、均勻、可控的樣品破碎方法,廣泛應(yīng)用于各個領(lǐng)域。通過對樣品的破碎控制和均勻處理,能夠?yàn)楹罄m(xù)的分析和測試提供穩(wěn)定的數(shù)據(jù)支持,提高實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)的效率和質(zhì)量。
應(yīng)用組織研磨儀:從生物學(xué)到材料科學(xué)的研究儀器
組織研磨儀是一種重要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料科學(xué)等多個領(lǐng)域。它通過高速旋轉(zhuǎn)或振動,將組織樣品研磨成均勻的細(xì)粉末,以便進(jìn)行后續(xù)的分析和實(shí)驗(yàn)。本文將探討應(yīng)用組織研磨儀在生物學(xué)和材料科學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用及其重要性。
一、生物學(xué)研究
在生物學(xué)研究中,組織研磨儀被廣泛應(yīng)用于樣品的制備和預(yù)處理。例如,在基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)研究中,需要對動植物組織、微生物樣品等進(jìn)行研磨和破碎,以釋放出其中的DNA、RNA和蛋白質(zhì)等生物分子。通過組織研磨儀的研磨作用,可以快速、有效地將樣品破碎成細(xì)粉末,提高樣品的提取效率和實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。
此外,組織研磨儀還被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、病理學(xué)等領(lǐng)域的研究。例如,在免疫學(xué)研究中,需要對免疫細(xì)胞進(jìn)行分離和純化,而組織研磨儀可以用于破碎免疫器官和細(xì)胞,提高細(xì)胞的分離效率和純度。在病理學(xué)研究中,組織研磨儀可以用于制作病理切片,對疾病進(jìn)行診斷和治療。
二、材料科學(xué)研究
在材料科學(xué)研究中,組織研磨儀也具有廣泛的應(yīng)用。例如,在材料合成和制備領(lǐng)域中,需要對原材料進(jìn)行破碎和混合,以制備出具有特定結(jié)構(gòu)和性能的材料。組織研磨儀可以通過調(diào)整研磨時間和研磨力度等參數(shù),控制材料的粒度和分布,提高材料的制備效率和性能。
此外,組織研磨儀還被廣泛應(yīng)用于材料的表征和分析中。例如,通過組織研磨儀的研磨作用,可以將材料表面粗糙度降低,提高材料的表面平整度和光滑度。同時,通過對材料進(jìn)行破碎和混合,可以制備出具有特定結(jié)構(gòu)和組成的材料樣品,以便進(jìn)行X射線衍射、電子顯微鏡等分析測試。
總之,應(yīng)用組織研磨儀是生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料科學(xué)等多個領(lǐng)域中重要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備之一。通過高速旋轉(zhuǎn)或振動,它可以將組織樣品研磨成均勻的細(xì)粉末,提高樣品的提取效率和實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。同時,應(yīng)用組織研磨儀還可以控制材料的粒度和分布,提高材料的制備效率和性能。